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慢病毒包装,需要裂解细胞使病毒释放出来么

2025年12月16日
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不需要。常规慢病毒(Lentivirus)包装和收集过程中,不建议也不需要裂解细胞。

1.为什么不需要裂解细胞?

慢病毒属于出芽型病毒(budding virus)在 293T 等包装细胞中,慢病毒会通过细胞膜持续出芽并释放到培养上清,病毒主要存在于培养上清,而不是细胞内。

👉 裂解细胞反而会带来问题:

  • 释放大量宿主蛋白、DNA、碎片

  • 增加毒性,影响后续感染

  • 降低病毒纯度,干扰滴度检测

  • 不会明显提高有效病毒产量

2.标准慢病毒收毒流程

  1. 转染 293T 包装细胞(三质粒或四质粒系统)

  2. 转染后 48 h、72 h 分别收集培养上清

  3. 3000 g 离心 10 min 去除细胞碎片

  4. 0.45 μm 滤膜过滤

  5. 直接使用,或进行 PEG 沉淀 / 超速离心浓缩

📌 全程 不裂解细胞

3.那什么时候“裂解细胞”会被提到?

通常是以下情况之一:

1️⃣ AAV 病毒

AAV 多数滞留在细胞内,必须裂解细胞释放病毒。 AAV 要裂解,慢病毒不要

2️⃣ 做病毒相关检测

如:

  • Western blot 检测 Gag、p24(用于验证包装)

  • 不是为了收病毒

3️⃣ 非标准或错误操作

裂解慢病毒包装细胞 ≠ 提高滴度
这是一个常见误区

关于金沙城js9线路中心

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,金沙城js9线路中心可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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